淺談三級病毒實驗室建設(shè)的要點

高傳染性病毒的的檢測要依賴于高等級的生物安全實驗室，目前全國僅有54家生物安全實驗室，建設(shè)布局上還有很大提升空間，此外，由于該項工作對科研人員的專業(yè)性和體能素質(zhì)都有極高的要求，所以對口人才的稀缺也是影響實驗室進一步發(fā)展的短板。陳曉光建議，應以“人、財、物”為抓手，建立一套完善的推動系統(tǒng)和人才扶持機制，保證運營經(jīng)費的投入，加強建設(shè)布局，才能維護該實驗室的平穩(wěn)運轉(zhuǎn)。

據(jù)了解，生物安全實驗室按照研究對象的不同而分為四級，其中三級實驗室適用于通過呼吸途徑使人傳染上嚴重致病微生物或其毒素，下面華銳實驗室小編為大家介紹P3級實驗室的特性要求，如有不明白之處可隨時咨詢我司技術(shù)人員。

實驗室生物安全防護實驗室是指實驗室的結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備能夠確保工作人員在處理含有致病微生物及其毒素時，不受實驗對象侵染，周圍環(huán)境不受污染。根據(jù)微生物及其毒素的危害程度不同，分為四級，一級最低，四級最高。

生物安全防護一級實驗室一般適用于對健康成年人無致病作用的微生物；二級適用于對人和環(huán)境有中等潛在危害的微生物；三級適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素；四級適用于對人體具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明、尚無有效疫苗或治療方法的致病微生物或其毒素。

設(shè)計要求

1 安全設(shè)備和個體防護

1.1 實驗室中必須安裝Ⅱ級或Ⅱ級以上生物安全柜。

1.2 所有涉及感染性材料的操作應在生物安全柜中進行。當這類操作不得不在生物安全柜外進行時，必須采用個體防護與使用物理抑制設(shè)備的綜合防護措施。

1.3 在進行感染性組織培養(yǎng)、有可能產(chǎn)生感染性氣溶膠的操作時，必須使用個體防護設(shè)備。

1.4 當不能安全有效地將氣溶膠限定在一定范圍內(nèi)時，應使用呼吸保護裝置。

1.5 工作人員在進入實驗室工作區(qū)前，應在專用的更衣室（或緩沖間）穿著背開式工作服或其他防護服。工作完畢必須脫下工作服，不得穿工作服離開實驗室?？稍俅问褂玫墓ぷ鞣仨毾认竞笄逑础?/p>

1.6 工作時必須戴手套（兩副為宜）。一次性手套必須先消毒后丟棄。

1.7 在實驗室中必須配備有效的消毒劑、眼部清洗劑或生理鹽水，且易于取用。可配備應急藥品。

2 實驗室設(shè)計和建造的特殊要求

2.1 選址

三級生物安全防護實驗室可與其他用途房屋設(shè)在一棟建筑物中，但必須自成一區(qū)。該區(qū)通過隔離門與公共走廊或公共部位相隔。

2.2 平面布局

a）三級生物安全防護實驗室的核心區(qū)包括實驗間及與之相連的緩沖間。

b）緩沖間形成進入實驗間的通道。必須設(shè)兩道連鎖門，當其中一道門打開時，另一道門自動處于關(guān)閉狀態(tài)。如使用電動連鎖裝置，斷電時兩道門均必須處于可打開狀態(tài)。在緩沖間可進行二次更衣。

c）當實驗室的通風系統(tǒng)不設(shè)自動控制裝置時，緩沖間面積不宜過大，不宜超過實驗間面積的八分之一。

d）Ⅱ級或Ⅲ級生物安全柜的安裝位置應遠離實驗間入口，避開工作人員頻繁走動的區(qū)域，且有利于形成氣流由“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域的氣流流型。

2.3 圍護結(jié)構(gòu)

a）實驗室（含緩沖間）圍護結(jié)構(gòu)內(nèi)表面必須光滑耐腐蝕、防水，以易于消毒清潔。所有縫隙必須加以可靠密封。

b）實驗室內(nèi)所有的門均可自動關(guān)閉。

c）除觀察窗外，不得設(shè)置任何窗戶。觀察窗必須為密封結(jié)構(gòu)，所用玻璃為不碎玻璃。

d）地面應無滲漏，光潔但不滑。不得使用地磚和水磨石等有縫隙地面。

e）天花板、地板、墻間的交角均為圓弧形且可靠密封，施工時應防止昆蟲和老鼠鉆進墻腳。

2.4 通風空調(diào)

a）必須安裝獨立的通風空調(diào)系統(tǒng)以控制實驗室氣流方向和壓強梯度。該系統(tǒng)必須確保實驗室使用時，室內(nèi)空氣除通過排風管道經(jīng)高效過濾排出外，不得從實驗室的其他部位或縫隙排向室外；同時確保實驗室內(nèi)的氣流由“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域。進風口和排風口的布局應使實驗區(qū)內(nèi)的死空間降低到最小程度。

b）通風空調(diào)系統(tǒng)為直排系統(tǒng)，不得采用部分回風系統(tǒng)。

c）環(huán)境參數(shù)：相對于實驗室外部，實驗室內(nèi)部保持負壓。實驗間的相對壓強以－30Pa～－40Pa為宜，緩沖間的相對壓強以－15Pa～－20Pa為宜。實驗室內(nèi)的溫、濕度以控制在人體舒適范圍為宜，或根據(jù)工藝要求而定。實驗室內(nèi)的空氣潔凈度以GB 50073—2001《潔凈廠房設(shè)計規(guī)范》中所定義的七級至八級為宜。實驗室人工照明應均勻，不眩目，照度不低于500lx。

d）為確保實驗室內(nèi)的氣流由“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域，實驗室內(nèi)不應使用雙側(cè)均勻分布的排風口布局。不應采用上送上排的通風設(shè)計。由生物安全柜排出的經(jīng)內(nèi)部高效過濾的空氣可通過系統(tǒng)的排風管直接排至大氣，也可送入建筑物的排風系統(tǒng)。應確保生物安全柜與排風系統(tǒng)的壓力平衡。

e）實驗室的進風應經(jīng)初、中、高效三級過濾。

f）實驗室的排風必須經(jīng)高效過濾或加其他方法處理后，以不低于12m/s的速度直接向空中排放。該排風口應遠離系統(tǒng)進風口位置。處理后的排風也可排入建筑物的排風管道，但不得被送回到該建筑物的任何部位。

g）進風和排風高效過濾器必須安裝在實驗室設(shè)在圍護結(jié)構(gòu)上的風口里，以避免污染風管。

h）實驗室的通風系統(tǒng)中，在進風和排風總管處應安裝氣密型調(diào)節(jié)閥門，必要時可完全關(guān)閉以進行室內(nèi)化學熏蒸消毒。

i）實驗室的通風系統(tǒng)中所使用的所有部件均必須為氣密型。所使用的高效過濾器不得為木框架。

j）應安裝風機啟動自動聯(lián)鎖裝置，確保實驗室啟動時先開排風機后開送風機。關(guān)閉時先關(guān)送風機后關(guān)排風機。

k）不得在實驗室內(nèi)安裝分體空調(diào)器。

2.5 安全裝置及特殊設(shè)備

a）必須在主實驗室內(nèi)設(shè)置Ⅱ級或Ⅲ級生物安全柜。其安裝位置應滿足6.3.2.5　d）中的要求。

b）連續(xù)流離心機或其他可能產(chǎn)生氣溶膠的設(shè)備應置于物理抑制設(shè)備之中，該裝置應能將其可能產(chǎn)生的氣溶膠經(jīng)高效過濾器過濾后排出。在實驗室內(nèi)所必須設(shè)置的所有其他排風裝置（通風櫥、排氣罩等）的排風均必須經(jīng)過高效過濾器過濾后方可排出。其室內(nèi)布置應有利于形成氣流由“清潔”區(qū)域流向“污染”區(qū)域的氣流流型。

c）實驗室中必須設(shè)置不產(chǎn)生蒸汽的高壓滅菌鍋或其他消毒裝置。

d）實驗間與外部應設(shè)置傳遞窗。傳遞窗雙門不得同時打開，傳遞窗內(nèi)應設(shè)物理消毒裝置。感染性材料必須放置在密閉容器中方可通過傳遞窗傳遞。

e）必須在實驗室入口處的顯著位置設(shè)置壓力顯示報警裝置，顯示實驗間和緩沖間的負壓狀況。當負壓指示偏離預設(shè)區(qū)間必須能通過聲、光等手段向?qū)嶒炇覂?nèi)外的人員發(fā)出警報.可在該裝置上增加送、排風高效過濾器氣流阻力的顯示。

f）實驗室啟動工作期間不能停電。應采用雙路供電電源。如難以實現(xiàn)，則應安裝停電時可自動切換的后備電源或不間斷電源，對關(guān)鍵設(shè)備（生物安全柜、通風櫥、排氣罩以及照明等）供電。

g）可在緩沖間設(shè)洗手池：洗手池的供水截門必須為腳踏、肘動或自動開關(guān)。洗手池如設(shè)在主實驗室，下水道必須與建筑物的下水管線分離，且有明顯標志。下水必須經(jīng)過消毒處理。洗手池僅供洗手用，不得向內(nèi)傾倒任何感染性材料。供水管必須安裝防回流裝置。不得在實驗室內(nèi)安設(shè)地漏。

2.6 其他

a）實驗臺表面應不透水，耐腐蝕、耐熱。

b）實驗室中的家具應牢固。為易于清潔，各種家具和設(shè)備之間應保持一定間隙。應有專門放置生物廢棄物容器的臺（架)。家具和設(shè)備的邊角和突出部位應光滑、無毛刺，以圓弧形為宜。

c）所需真空泵應放在實驗室內(nèi)。真空管線必須裝置在線高效過濾器。

d）壓縮空氣等鋼瓶應放在實驗室外。穿過圍護結(jié)構(gòu)的管道與圍護結(jié)構(gòu)之間必須用不收縮的密封材料加以密封。氣體管線必須裝置在線高效過濾器和防回流裝置。

e）實驗室中應設(shè)置洗眼裝置。

f）實驗室出口應有發(fā)光指示標志。

g）實驗室內(nèi)外必須設(shè)置通訊系統(tǒng)。

·病毒培養(yǎng)應當在生物安全三級實驗室內(nèi)進行，使用病毒培養(yǎng)物提取核酸，裂解劑或滅活劑的加入，必須在與病毒培養(yǎng)等同級別的實驗室和防護條件下進行，裂解劑或滅活劑加入后可比照未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料的防護等級進行操作。實驗室開展相關(guān)活動前，應當報經(jīng)國家衛(wèi)生健康委批準，取得開展相應活動的資質(zhì)。

·動物感染實驗：應當在生物安全三級實驗室操作。實驗室開展相關(guān)活動前，應當報經(jīng)國家衛(wèi)生健康委批準，取得開展相應活動的資質(zhì)。

· 未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料的操作，應當在生物安全二級實驗室進行，同時采用生物安全三級實驗室的個人防護。

·滅活材料的操作：感染性材料或活病毒在采用可靠的方法滅活后，進行的核酸檢測、抗原檢測、血清學檢測、生化分析等操作應當在生物安全二級實驗室進行。分子克隆等不含致病性活病毒的其他操作，可以在生物安全一級實驗室進行。

二、關(guān)于運輸

· 國內(nèi)運輸：新型冠狀病毒毒株或其他潛在感染性生物材料的運輸包裝分類屬于A類，對應的聯(lián)合國編號為UN2814，包裝符合國際民航組織文件Doc9284《危險品航空安全運輸技術(shù)細則》的PI602分類包裝要求；環(huán)境樣本屬于B類，對應的聯(lián)合國編號為UN3373，包裝符合國際民航組織文件Doc9284《危險品航空安全運輸技術(shù)細則》的PI650分類包裝要求；通過其他交通工具運輸?shù)目蓞⒄找陨蠘藴拾b。

新型冠狀病毒毒株或其他潛在感染性材料運輸應當按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》（衛(wèi)生部令第45號）辦理《準運證書》。

· 國際運輸：新型冠狀病毒毒株或樣本在國際間運輸?shù)模瑧斠?guī)范包裝，按照《出入境特殊物品衛(wèi)生檢疫管理規(guī)定》辦理相關(guān)手續(xù)，并滿足相關(guān)國家和國際相關(guān)要求。

· 毒株和樣本管理：新型冠狀病毒毒株和相關(guān)樣本應當由專人管理，準確記錄毒株和樣本的來源、種類、數(shù)量、編號登記，采取有效措施確保毒株和樣本的安全，嚴防發(fā)生誤用、惡意使用、被盜、被搶、丟失、泄露等事件。

三、關(guān)于廢棄物管理

· 開展新型冠狀病毒相關(guān)實驗活動的實驗室應當制定廢棄物處置程序文件及污物、污水處理操作程序。

· 所有的危險性廢棄物必須依照統(tǒng)一規(guī)格化的容器和標示方式，完整并且合規(guī)地標示廢棄物內(nèi)容。

· 應當由經(jīng)過適當培訓的人員使用適當?shù)膫€人防護裝備和設(shè)備處理危險廢棄物。

· 關(guān)于廢棄物的處理措施有明確要求：

1，液體廢物的處理

（1）普通污水產(chǎn)生于洗手池等設(shè)備，對此類污水應當單獨收集，排入實驗室水處理系統(tǒng)，經(jīng)處理達標后方可排放。

（2）感染性廢液即在實驗操作過程中產(chǎn)生的廢水，采用化學消毒或物理消毒方式處理，并對消毒效果進行驗證，確保徹底滅活。

（3）工作人員應當及時處理廢棄物，不得將廢棄物帶出實驗區(qū)。

2.固體廢物的處理：

（1）固體廢物分類收集，固體廢物的收集容器應當具有不易破裂、防滲漏、耐濕耐熱、可密封等特性。實驗室內(nèi)的感染性垃圾不允許堆積存放，應當及時壓力蒸汽滅菌處理。廢物處置之前，應當存放在實驗室內(nèi)指定的安全地方。

（2）小型固體廢物如組織標本、耗材、個人防護裝備等均需經(jīng)過壓力蒸汽滅菌處理，再沿廢棄物通道移出實驗室。

（3）體積較大的固體廢物如HEPA過濾器，應當由專業(yè)人士進行原位消毒后，裝入安全容器內(nèi)進行消毒滅菌。不能進行壓力蒸汽滅菌的物品如電子設(shè)備可以采用環(huán)氧乙烷熏蒸消毒處理。

（4）經(jīng)消毒滅菌處理后移出實驗室的固體廢物，集中交由固體廢物處理單位處置。

（5）實驗過程如使用銳器（包括針頭、小刀、金屬和玻璃等）要直接棄置于銳器盒內(nèi)，高壓滅菌后，再做統(tǒng)一處理。

3. 建立廢棄物處理記錄：定期對實驗室排風HEPA過濾器進行檢漏和更換，定期對處理后的污水進行監(jiān)測，采用生物指示劑監(jiān)測壓力蒸汽滅菌效果。

四、實驗室生物安全操作失誤或意外的處理

（一）新型冠狀病毒毒株或其他潛在感染性材料污染生物安全柜的操作臺造成局限污染：使用有效氯含量為0.55%消毒液，消毒液需要現(xiàn)用現(xiàn)配，24小時內(nèi)使用。此后內(nèi)容中有效氯含量參照此濃度。

（二）含病毒培養(yǎng)器皿碎裂或傾覆造成實驗室污染：保持實驗室空間密閉，避免污染物擴散，使用0.55%有效氯消毒液的毛巾覆蓋污染區(qū)。必要時(大量溢撒時)可用過氧乙酸加熱熏蒸實驗室，劑量為2g/m3，熏蒸過夜；或20g/L過氧乙酸消毒液用氣溶膠噴霧器噴霧，用量8ml/m3，作用1～2小時；必要時或用高錳酸鉀-甲醛熏蒸：高錳酸鉀8g/m3，放入耐熱耐腐蝕容器（陶罐或玻璃容器），后加入甲醛（40%）10ml/m3，熏蒸4小時以上。熏蒸時室內(nèi)濕度60%-80%。

（三）清理污染物嚴格遵循活病毒生物安全操作要求，采用壓力蒸汽滅菌處理，并進行實驗室換氣等，防止次生危害。