分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)

分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)

基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室（PCR實(shí)驗(yàn)室）：
PCR是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)的常規(guī)方法，并沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求，但是為了避免各個(gè)試驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排是氣流組織形式。同時(shí)，要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。
試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)：
該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)，不得經(jīng)過(guò)其它區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。對(duì)氣流壓力的控制，本區(qū)并沒(méi)有嚴(yán)格的要求。
標(biāo)本制備區(qū)：
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸（RNA、DNA）提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定RNA時(shí)cDNA的合成。本區(qū)的壓力梯度要求為相對(duì)于臨近區(qū)域?yàn)檎龎海员苊鈴泥徑鼌^(qū)域進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。另外，由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染，所以應(yīng)避免在本區(qū)域內(nèi)不必要的走動(dòng)。
擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)：
擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)：該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為NDA或cDNA擴(kuò)增。此外，已制備的DNA模板和合成的cDNA（來(lái)自樣本制備區(qū)）的加入和主反應(yīng)混合液（來(lái)自試劑貯存和制備區(qū)）制備成反應(yīng)混合液等也可以在本區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。在巢氏PCR測(cè)定中，通常在第一輪擴(kuò)增后必須打開(kāi)反應(yīng)管。因此巢氏擴(kuò)增有較高的污染危險(xiǎn)性，第二次加樣必須在本區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)域漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。
擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：
該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測(cè)定。如使用全自動(dòng)封閉分析儀器檢測(cè)，此區(qū)域可不設(shè)。本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源，因此對(duì)本區(qū)的壓力梯度的要求為：相對(duì)于臨近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)域擴(kuò)散至其它區(qū)域。
完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施：
完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施是保證實(shí)驗(yàn)工作的必要條件，應(yīng)根據(jù)各個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器，如超凈工作臺(tái)、生物安全柜、離心機(jī)、加樣器等。

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